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产品介绍


AnnoLib DNA Library Prep Kit for Illumina建库试剂盒适用于完整基因组、机械打断DNA、cDNA双链产物等多种样本类型,1 ng-1 μg的DNA样本起始量均可完成建库。一步完成DNA片段化、末端修复和加A,不到2小时即可完成建库过程。共有3种规格:6rxn,24rxn和96rxn可供选择。

AnnoLib DNA Library Prep Kit for Illumina建库试剂盒



技术流程


建库试剂盒技术流程




样本要求


建库试剂盒样本要求

案例解析


使用AnnoLib DNA Library Prep Kit for Illumina建库试剂盒构建DNA小片段文库,通过Agilent 2100 Bioanalyzer进行文库片段分布检测,检测结果如下图所示:


基因组文库检测峰图

文库通过Illumina测序平台测序,数据平均Q30在90%以上,碱基含量分布正常。


碱基质量分布图


碱基质量分布图





FAQ


QAnnoLib DNA建库试剂盒文库结构


A


文库序列


文库序列:

5’AATGATACGGCGACCACCGAGATCTI5 IndexACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT插入片段 AGATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCACI7 IndexATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG3’



Q自备试剂


A

纯化磁珠:Ann Beads 或其他等效产品;

其他材料:无水乙醇、灭菌超纯水、低吸附 EP 管、PCR 管、 磁力架、PCR 仪等。



Q注意事项


A

1. 开始实验前请仔细阅读说明书全文,并且严格按照要求 进行操作。

2. Fragmentase 0.5μL 用量,理论上打断后片段主峰是 350bp,DNA 样本纯度影响打断的均一性。

3. 注意一定要使用新鲜配制的乙醇进行纯化步骤。

4. 整个实验过程需避免外源 DNA 污染。



Q文库质检方法


A

推荐使用荧光染料法 (Qubit®) 或 qPCR 绝对定量法进行文库浓度测定,使用Agilent 2100 Bioanalyzer 进行文库片段分布检测。





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